PEMBUATAN MEDIA MS KULTUR JARINGAN TANAMAN
Media kultur menyediakan unsur hara baik
makro maupun mikro, sumber vitamin dan asam amino, sumber karbohidrat, zat
pengatur tumbuh, senyawa organik sebagai tambahan seperti air kelapa, bahan
pemadat : agar-agar dan gelrite. Media dasar murashige and skoog (MS) termasuk
media kultur yang komposisisi unsur nya lebih lengkap dibandingkan media dasar
lain nya serta memiliki kandungan nitrat, kalium dan amonium yang tinggi,
walaupun demikian perlu ditambah suplemen seperti air kelapa untuk mendorong
pertumbuhan jaringan. Kisaran indeks (PH) media adalah 5,5 sampai 5,8 Komposisi
dalam media Murashige and skoog (MS) digunakan untuk differensiasi sel.
Keistimewaan media MS adalah kandungan nitrat, kalium, dan amonium nya yang
tinggi.
Pembuatan
media kultur diawali dengan penyediaan larutan stok dari media Murashige and
Skoog padat dilengkapi dengan 0,25 ml/l Benzyl Amino Purine, 0,5 mg/l
Gibberilic Acid. Penggunaan larutan stok bertujuan untuk menghemat pekerjaan
atau mempermudah setiap kali membuat media kultur. Selain itu garam mineral
terutama mikronutrien dan vitamin di dalam media kultur diperlukan dalam jumlah
yang relatif kecil oleh karena itu perlu di butuhkan stok untuk mempermudah
penimbangan. Larutan stok yang disediakan antara lain larutan stok makronutrien, larutan stok mikronutrien, larutan stok vitamin, larutan stok myo
inositol, larutan stok Fe-EDTA.
selanjutnya pembuatan agar dengan memasukkan agar dengan aquadest dan didihkan dengan api kecil Kemudian semua bahan pembuatan media MS dimasukkan dalam panci dan diaduk hingga homogen serta dilakukan pengukuran pH larutan 5,5 – 5,8 jika terlalu asam maka perlu ditambahkan NaOH, apabila terlalu basa maka ditambahkan HCL hingga pH sesuai dengan yang diinginkan. Setelah larutan siap dilakukan penuangan media ke dalam botol kultur kira – kira 5ml dan tutup botol sampai rapat. Kemudian sterilisasi media menggunakan autoklaf manual selama 20 menit dengan suhu 121˚C dan tekanan 1,5-1,7 psi. Media yang teah di sterilkan di simpan di ruang penyimpanan
Apakah panci presto bisa menggantikan autoclaf ???
ReplyDelete